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    分享三種關于嘔吐毒素免疫親和柱對樣品處理的方法

    發布時間: 2021-06-17  點擊次數: 3599次
      嘔吐毒素免疫親和柱主要是由鐮刀菌的某些種產生的化學結構和生物活性相似的有毒代謝產物——單端孢霉烯族化合物中的一種。廣泛存在于全球,主要污染小麥、大麥、玉米等谷類作物,也污染糧食制品,人和動物在誤食被該毒素污染的糧谷類后可以產生廣泛的毒性效應。DON明顯的毒性作用是引起嘔吐、腹瀉、腹痛等癥狀,并延緩生長、降低免疫機能,與貧血、免疫抑制、食管癌、克山病也具有密切聯系。給人、家畜的健康造成巨大威脅。
     
      試驗原理:
      本產品的測定的基礎是抗原抗體反應,脫氧雪腐鐮刀菌烯醇單克隆抗體連接在柱內凝膠上,樣品中的脫氧雪腐鐮刀菌烯醇經過提取、過濾、稀釋,然后將樣品提取液緩慢的通過脫氧雪腐鐮刀菌烯醇免疫親和層析柱,在免疫親和柱內,脫氧雪腐鐮刀菌烯醇與抗體結合,之后洗滌免疫親和柱除去沒有被結合的其他物質。用甲醇洗脫脫氧雪腐鐮刀菌烯醇,然后注入到分析儀器中用于檢測。

      嘔吐毒素免疫親和柱的樣品處理:
      方法一:酒類
      取脫氣的酒類樣品加入聚乙二醇8000,用PBS緩沖液定容;高速均質;用快速定性濾紙過濾,收集濾液;再用微纖維濾紙過濾,并收集濾液作為上樣液;取上樣液過免疫親和柱凈化。
      稀釋倍數:2
     
      方法二:醬油、醋、醬及醬制品;
      取樣品,加入聚乙二醇8000,用PBS緩沖液定容;高速均質;用快速定性濾紙過濾,收集濾液;再用微纖維濾紙過濾,并收集濾液作為上樣液;取上樣液過免疫親和柱凈化。
      稀釋倍數:2
     
      方法三:糧食及飼料
      1、玉米、小麥、面粉、配合飼料、濃縮料、精補料等吸水性較小的樣本;
      稱取粉碎樣品,聚乙二醇8000,加入蒸餾水;高速均質;用快速定性濾紙過濾,收集濾液;再用微纖維濾紙過濾,并收集濾液作為上樣液;取上樣液過免疫親和柱凈化。
      稀釋倍數:2
      2、麩皮、豆皮、玉米胚芽粕、米糠等吸水性較強的樣本;
      稱取樣品,聚乙二醇8000,加入蒸餾水;高速均質;用快速定性濾紙過濾,收集濾液;再用微纖維濾紙過濾,并收集濾液作為上樣液;取上樣液過免疫親和柱凈化。
      稀釋倍數:2
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