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    黃曲霉毒素免疫親合柱反應原理及樣品提取說明

    發(fā)布時間: 2022-01-19  點擊次數: 3499次
      黃曲霉毒素免疫親合柱產品概述:
     
      黃曲霉毒素是一類真菌(如黃曲霉和寄生曲霉)的有毒性的代謝產物,是一種毒性*的物質,具有很強的致癌性。黃曲霉毒素的危害性在于對人及動物肝臟組織的破壞作用,嚴重時可導致肝癌甚至死亡。在天然污染的食品中以黃曲霉毒素B1為多見,其毒性和致癌性也是*的。在玉米、花生、小麥、棉花種子和一些干果中常能檢測到黃曲霉毒素B1。
     
      反應原理:
     
      黃曲霉毒素免疫親合柱測定的原理是抗原抗體反應。黃曲霉毒素B1單克隆抗體固定于柱內凝膠上,樣品中的黃曲霉毒素B1經過提取、過濾、稀釋,然后緩慢通過黃曲霉毒素B1免疫親和柱,在柱內黃曲霉毒素B1與抗體特異性結合,之后洗滌免疫親和柱,除去未結合的其他物質。用甲醇洗脫黃曲霉毒素B1,注入到分析儀器中進行檢測。
     
      黃曲霉毒素免疫親合柱檢測樣品提取及稀釋:
     
      大米、玉米、小麥、堅果、調料、花生及其制品:準確稱取試樣25.0g于250mL具塞錐形瓶中,加入5.0g氯化鈉及準確加入125.0mL甲醇-水(7+3),以均質器高速攪拌提取2min。槽紋濾紙過濾,準確移取15.0mL濾液并加入30.0mL水稀釋,用玻璃纖維濾紙過濾,至濾液澄清,備用。
     
      植物油脂:準確稱取試樣25.0g于250mL具塞錐形瓶中,加入5.0g氯化鈉及入125.0mL甲醇-水(7+3),以均質器高速攪拌提取2min。槽紋濾紙過濾,準確移取15.0mL濾液并加入30.0mL水稀釋,用玻璃纖維濾紙過濾,至濾液澄清,備用。
     
      醬油:稱取試樣50.0g于250.0mL具塞錐形瓶中,加入2.5g氯化鈉及加入甲醇-水(8+2)至100.0mL,以均質器高速攪拌提取1min。槽紋濾紙過濾,準確移取10.0mL濾液并加入40.0mL水稀釋,用玻璃纖維濾紙過濾,至濾液澄清,備用。
     
      食醋:準確稱取5.0g樣品,加入1.0g氯化鈉,以pH7.0磷酸鹽緩沖溶液稀釋至25.0mL,混勻,定量濾紙過濾。取10.0mL濾液加入10.0mL pH7.0磷酸鹽緩沖溶液,混勻。以玻璃纖維濾紙過濾,至濾液澄清,備用。
     
      飼料:準確稱取試樣50.0g于250mL具塞錐形瓶中,加入5.0g氯化鈉及入100.0mL甲醇-水(8+2),以均質器高速攪拌提取2min。槽紋濾紙過濾,準確移取10.0mL濾液并加入40.0mL pH7.0 PBS稀釋,用玻璃纖維濾紙過濾,至濾液澄清,備用。
     
      樣品的凈化
     
      黃曲霉毒素免疫親合柱的柱容量(最大吸附黃曲霉毒素量)為300ng,當樣品中黃曲霉毒素超過測定范圍時,請適當減小上柱體積,使其在檢測范圍內,計算出準確含量。
     
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